Jaunā autologo šūnu terapija, izmantojot ar trombocītiem bagātinātu plazmu (PRP), var spēlēt papildu lomu dažādos reģeneratīvās medicīnas ārstēšanas plānos.Pasaulē ir neapmierināts pieprasījums pēc audu atjaunošanas stratēģijām, lai ārstētu pacientus ar muskuļu un skeleta sistēmas (MSK) un mugurkaula slimībām, osteoartrītu (OA) un hroniskām sarežģītām un ugunsizturīgām brūcēm.PRP terapija balstās uz faktu, ka trombocītu augšanas faktors (PGF) atbalsta brūču dzīšanu un labošanas kaskādi (iekaisumu, proliferāciju un pārveidošanos).Pētījumos ar cilvēkiem, in vitro un dzīvniekiem ir novērtēti vairāki dažādi PRP preparāti.Tomēr in vitro un dzīvnieku pētījumu ieteikumi parasti noved pie atšķirīgiem klīniskiem rezultātiem, jo neklīnisko pētījumu rezultātus un metožu ieteikumus ir grūti pārvērst cilvēka klīniskajā ārstēšanā.Pēdējos gados ir panākts progress PRP tehnoloģijas un bioloģisko aģentu jēdziena izpratnē, un ir ierosināti jauni pētījumu norādījumi un jaunas indikācijas.Šajā pārskatā mēs apspriedīsim jaunākos sasniegumus PRP sagatavošanā un sastāvā, tostarp trombocītu devu, leikocītu aktivitāti un iedzimto un adaptīvo imūnregulāciju, 5-hidroksitriptamīna (5-HT) efektu un sāpju mazināšanu.Turklāt mēs apspriedām PRP mehānismu, kas saistīts ar iekaisumu un angiogenēzi audu remonta un reģenerācijas laikā.Visbeidzot, mēs pārskatīsim dažu zāļu ietekmi uz PRP aktivitāti.
Autologā ar trombocītiem bagātināta plazma (PRP) ir autologo perifēro asiņu šķidrā daļa pēc apstrādes, un trombocītu koncentrācija ir augstāka par sākotnējo līmeni.PRP terapija dažādām indikācijām tiek izmantota vairāk nekā 30 gadus, kā rezultātā ir radusies liela interese par autogēnās PRP potenciālu reģeneratīvajā medicīnā.Termins ortopēdiskais bioloģiskais līdzeklis nesen tika ieviests, lai ārstētu muskuļu un skeleta sistēmas (MSK) slimības, un tas ir sasniedzis daudzsološus rezultātus heterogēnu bioaktīvo PRP šūnu maisījumu reģenerācijas spējās.Pašlaik PRP terapija ir piemērota ārstēšanas iespēja ar klīniskiem ieguvumiem, un ziņotie pacientu rezultāti ir iepriecinoši.Tomēr pacientu rezultātu nekonsekvence un jaunas atziņas ir radījušas izaicinājumus PRP klīniskās pielietošanas praktiskumam.Viens no iemesliem var būt PRP un PRP tipa sistēmu skaits un mainīgums tirgū.Šīs ierīces atšķiras PRP savākšanas apjoma un sagatavošanas shēmas ziņā, kā rezultātā ir unikālas PRP īpašības un bioloģiskie aģenti.Turklāt vienprātības trūkums par PRP sagatavošanas shēmas standartizāciju un pilnu ziņojumu par bioloģiskajiem aģentiem klīniskajā lietošanā izraisīja pretrunīgus ziņojumu rezultātus.Ir veikti daudzi mēģinājumi raksturot un klasificēt PRP vai no asinīm iegūtos produktus reģeneratīvās medicīnas lietojumos.Turklāt ortopēdiskajai un in vitro cilmes šūnu izpētei ir ierosināti trombocītu atvasinājumi, piemēram, cilvēka trombocītu lizāti.
Viens no pirmajiem komentāriem par PRP tika publicēts 2006. gadā. Šajā pārskatā galvenā uzmanība ir pievērsta trombocītu funkcijai un darbības veidam, PRP ietekmei uz katru dziedināšanas kaskādes posmu un trombocītu izcelsmes augšanas faktora galvenajai lomai. dažādās PRP indikācijās.PRP pētījumu sākumposmā galvenā interese par PRP vai PRP-gelu bija vairāku trombocītu augšanas faktoru (PGF) esamība un specifiskās funkcijas.
Šajā rakstā mēs plaši apspriedīsim dažādu PRP daļiņu struktūru un trombocītu šūnu membrānas receptoru jaunāko attīstību un to ietekmi uz iedzimto un adaptīvo imūnsistēmas imūnregulāciju.Turklāt tiks detalizēti apspriesta atsevišķu šūnu loma, kas var pastāvēt PRP ārstēšanas flakonā, un to ietekme uz audu reģenerācijas procesu.Turklāt tiks aprakstīti jaunākie sasniegumi PRP bioloģisko aģentu izpratnē, trombocītu devas, specifisku balto asinsķermenīšu specifiskās ietekmes, kā arī PGF koncentrācijas un citokīnu ietekmes uz mezenhimālo cilmes šūnu (MSC) uzturvielu ietekmi, tostarp PRP, kas mērķēts uz dažādām. šūnu un audu vide pēc šūnu signālu transdukcijas un parakrīnajiem efektiem.Tāpat mēs apspriedīsim PRP mehānismu, kas saistīts ar iekaisumu un angiogenēzi audu remonta un reģenerācijas laikā.Visbeidzot, mēs apskatīsim PRP pretsāpju efektu, dažu zāļu ietekmi uz PRP aktivitāti, kā arī PRP un rehabilitācijas programmu kombināciju.
Klīniskās ar trombocītiem bagātinātās plazmas terapijas pamatprincipi
PRP preparāti kļūst arvien populārāki un plaši izmantoti dažādās medicīnas jomās.PRP ārstēšanas zinātniskais pamatprincips ir tāds, ka koncentrētu trombocītu injekcija traumētajā vietā var uzsākt audu atjaunošanos, jaunu saistaudu sintēzi un asinsrites atjaunošanos, atbrīvojot daudzus bioloģiski aktīvus faktorus (augšanas faktorus, citokīnus, lizosomas) un adhēzijas proteīni, kas ir atbildīgi par hemostatiskās kaskādes reakcijas ierosināšanu.Turklāt plazmas olbaltumvielas (piemēram, fibrinogēns, protrombīns un fibronektīns) atrodas trombocītu nabadzīgos plazmas komponentos (PPP).PRP koncentrāts var stimulēt augšanas faktoru hiperfizioloģisko izdalīšanos, lai uzsāktu hronisku traumu dziedināšanu un paātrinātu akūtu traumu atjaunošanās procesu.Visos audu atjaunošanas procesa posmos dažādi augšanas faktori, citokīni un lokālie darbības regulatori veicina vairumu šūnu pamatfunkciju, izmantojot endokrīnos, parakrīnos, autokrīnos un endokrīnos mehānismus.Galvenās PRP priekšrocības ir tā drošība un ģeniālā pašreizējā komerciālā aprīkojuma sagatavošanas tehnoloģija, ar kuras palīdzību var sagatavot plaši izmantojamus bioloģiskos aģentus.Pats galvenais, salīdzinot ar parastajiem kortikosteroīdiem, PRP ir autogēns produkts, kam nav zināmu blakusparādību.Tomēr nav skaidru noteikumu par injicējamā PRP sastāva formulu un sastāvu, un PRP sastāvam ir lielas izmaiņas trombocītu, balto asins šūnu (WBC) saturā, sarkano asins šūnu (RBC) piesārņojumā un PGF koncentrācijā.
PRP terminoloģija un klasifikācija
Gadu desmitiem ilgi PRP produktu izstrāde, ko izmanto, lai stimulētu audu atjaunošanos un reģenerāciju, ir bijusi nozīmīga biomateriālu un zāļu zinātnes pētniecības joma.Audu dziedināšanas kaskādē piedalās daudzi dalībnieki, tostarp trombocīti un to augšanas faktori un citokīnu granulas, baltās asins šūnas, fibrīna matrica un daudzi citi sinerģiski citokīni.Šajā kaskādes procesā notiks sarežģīts koagulācijas process, tostarp trombocītu aktivācija un sekojoša blīvēšana, un α- trombocītu daļiņu satura izdalīšanās, fibrinogēna (ko izdala trombocīti vai brīvs plazmā) agregācija fibrīna tīklā un veidošanās. trombocītu embolija.
“Universālais” PRP simulē dziedināšanas sākumu
Sākumā terminu “ar trombocītiem bagātināta plazma (PRP)” sauca par trombocītu koncentrātu, ko izmantoja asins pārliešanas medicīnā, un to lieto arī mūsdienās.Sākotnēji šie PRP produkti tika izmantoti tikai kā fibrīna audu līme, savukārt trombocīti tika izmantoti tikai spēcīgākas fibrīna polimerizācijas atbalstam, lai uzlabotu audu blīvēšanu, nevis kā dziedināšanas stimulatoru.Pēc tam PRP tehnoloģija tika izstrādāta, lai simulētu dziedināšanas kaskādes sākšanos.Pēc tam PRP tehnoloģija tika apkopota, izmantojot tās spēju ieviest un atbrīvot augšanas faktorus vietējā mikrovidē.Šis entuziasms par PGF piegādi bieži slēpj citu komponentu svarīgo lomu šajos asins atvasinājumos.Šis entuziasms vēl vairāk pastiprinās zinātnisku datu trūkuma, mistisku uzskatu, komerciālu interešu un standartizācijas un klasifikācijas trūkuma dēļ.
PRP koncentrāta bioloģija ir tikpat sarežģīta kā pašas asinis, un tā var būt sarežģītāka nekā tradicionālās zāles.PRP produkti ir dzīvi biomateriāli.Klīniskās PRP lietošanas rezultāti ir atkarīgi no pacienta asiņu raksturīgajām, universālajām un adaptīvajām īpašībām, ieskaitot dažādus citus šūnu komponentus, kas var pastāvēt PRP paraugā, un receptora lokālās mikrovides, kas var būt akūtā vai hroniskā stāvoklī.
Mulsinošās PRP terminoloģijas un piedāvātās klasifikācijas sistēmas kopsavilkums
Jau daudzus gadus praktiķus, zinātniekus un uzņēmumus ir nomocījuši sākotnējie PRP izstrādājumu un to dažādo terminu pārpratumi un defekti.Daži autori definēja PRP kā tikai trombocītus, savukārt citi norādīja, ka PRP satur arī sarkanās asins šūnas, dažādas baltās asins šūnas, fibrīnu un bioaktīvos proteīnus ar paaugstinātu koncentrāciju.Tāpēc klīniskajā praksē ir ieviesti daudzi dažādi PRP bioloģiskie aģenti.Vilšanos rada tas, ka literatūrā parasti trūkst detalizēta bioloģisko aģentu apraksta.Produktu sagatavošanas standartizācijas un turpmākās klasifikācijas sistēmas izstrādes neveiksmes rezultātā tika izmantots liels skaits PRP produktu, kas aprakstīti ar dažādiem terminiem un saīsinājumiem.Nav pārsteidzoši, ka izmaiņas PRP preparātos izraisa pretrunīgus pacientu rezultātus.
Kingslijs pirmo reizi lietoja terminu “ar trombocītiem bagāta plazma” 1954. gadā. Daudzus gadus vēlāk Ehrenfest et al.Tika ierosināta pirmā klasifikācijas sistēma, kuras pamatā ir trīs galvenie mainīgie (trombocītu, leikocītu un fibrīna saturs), un daudzi PRP produkti tika iedalīti četrās kategorijās: P-PRP, LR-PRP, tīrs ar trombocītiem bagāts fibrīns (P-PRF) un leikocīti. bagāts PRF (L-PRF).Šie produkti tiek sagatavoti pēc pilnībā automātiskas slēgtās sistēmas vai manuālā protokola.Tikmēr Everts u.c.Tika uzsvērta balto asins šūnu pieminēšanas nozīme PRP preparātos.Viņi arī iesaka lietot atbilstošu terminoloģiju, lai apzīmētu PRP preparātu un trombocītu gēla neaktīvās vai aktivizētās versijas.
Delong et al.ierosināja PRP klasifikācijas sistēmu, ko sauc par trombocītiem, aktivētajām baltajām asins šūnām (PAW), pamatojoties uz absolūto trombocītu skaitu, ieskaitot četrus trombocītu koncentrācijas diapazonus.Citi parametri ietver trombocītu aktivatoru lietošanu un balto asins šūnu (ti, neitrofilu) esamību vai neesamību.Mishra et al.Ir ierosināta līdzīga klasifikācijas sistēma.Dažus gadus vēlāk Mautners un viņa kolēģi aprakstīja sarežģītāku un detalizētāku klasifikācijas sistēmu (PLRA).Autore pierādīja, ka ir svarīgi aprakstīt absolūto trombocītu skaitu, balto asinsķermenīšu saturu (pozitīvs vai negatīvs), neitrofilu procentuālo daudzumu, RBC (pozitīvs vai negatīvs) un to, vai tiek izmantota eksogēna aktivācija.2016. gadā Magalon u.c.Tika publicēta DEPA klasifikācija, pamatojoties uz trombocītu injekcijas devu, ražošanas efektivitāti, iegūtā PRP tīrību un aktivācijas procesu.Pēc tam Lana un viņas kolēģi ieviesa MARSPILL klasifikācijas sistēmu, koncentrējoties uz perifēro asiņu mononukleārajām šūnām.Nesen Zinātniskās standartizācijas komiteja iestājās par Starptautiskās trombozes un hemostāzes biedrības klasifikācijas sistēmas izmantošanu, kas ir balstīta uz virkni vienprātīgu ieteikumu, lai standartizētu trombocītu produktu lietošanu reģeneratīvās medicīnas lietojumos, tostarp saldētus un atkausētus trombocītu produktus.
Pamatojoties uz dažādu praktiķu un pētnieku piedāvāto PRP klasifikācijas sistēmu, daudzi neveiksmīgi mēģinājumi standartizēt PRP ražošanu, definīciju un formulu, ko izmantos ārsti, var izdarīt taisnīgu secinājumu, kas, visticamāk, nenotiks tuvāko gadu laikā. , klīnisko PRP produktu tehnoloģija turpina attīstīties, un zinātniskie dati liecina, ka dažādu patoloģiju ārstēšanai īpašos apstākļos ir nepieciešami dažādi PRP preparāti.Tāpēc mēs sagaidām, ka ideālās PRP ražošanas parametri un mainīgie lielumi nākotnē turpinās pieaugt.
Notiek PRP sagatavošanas metode
Saskaņā ar PRP terminoloģiju un produkta aprakstu dažādiem PRP formulējumiem tiek izlaistas vairākas klasifikācijas sistēmas.Diemžēl nav vienprātības par PRP vai citu autologu asiņu un asins produktu visaptverošo klasifikācijas sistēmu.Ideālā gadījumā klasifikācijas sistēmā būtu jāpievērš uzmanība dažādām PRP pazīmēm, definīcijām un atbilstošai nomenklatūrai, kas saistīta ar pacientu ar specifiskām slimībām ārstēšanas lēmumiem.Pašlaik ortopēdiskie lietojumi iedala PRP trīs kategorijās: tīrs ar trombocītiem bagāts fibrīns (P-PRF), ar leikocītiem bagāts PRP (LR-PRP) un leikocītu deficīta PRP (LP-PRP).Lai gan tā ir specifiskāka nekā vispārējā PRP produkta definīcija, LR-PRP un LP-PRP kategorijām acīmredzami trūkst balto asinsķermenīšu satura specifikas.Pateicoties imūnsistēmas un saimniekorganisma aizsardzības mehānismiem, baltās asins šūnas ir ļoti ietekmējušas hronisku audu slimību raksturīgo bioloģiju.Tāpēc PRP bioloģiskie aģenti, kas satur specifiskas baltās asins šūnas, var ievērojami veicināt imūno regulējumu un audu atjaunošanos un reģenerāciju.Konkrētāk, limfocīti ir daudz PRP, ražojot insulīnam līdzīgu augšanas faktoru un atbalstot audu remodelāciju.
Monocītiem un makrofāgiem ir galvenā loma imūnregulācijas procesā un audu atjaunošanas mehānismā.Neitrofilu nozīme PRP nav skaidra.LP-PRP tika noteikts kā pirmais PRP preparāts sistemātiski izvērtējot, lai sasniegtu efektīvus locītavu OA ārstēšanas rezultātus.Tomēr Lana et al.Pretstatā ir LP-PRP izmantošana ceļa OA ārstēšanā, kas liecina, ka specifiskām baltajām asins šūnām ir liela nozīme iekaisuma procesā pirms audu reģenerācijas, jo tās izdala pro-iekaisuma un pretiekaisuma molekulas.Viņi atklāja, ka neitrofilu un aktivēto trombocītu kombinācijai bija vairāk pozitīvas ietekmes nekā negatīva ietekme uz audu atjaunošanos.Viņi arī norādīja, ka monocītu plastiskums ir svarīgs audu remonta neiekaisuma un remonta funkcijai.
Ziņojums par PRP sagatavošanas shēmu klīniskajos pētījumos ir ļoti pretrunīgs.Lielākajā daļā publicēto pētījumu nav ierosināta PRP sagatavošanas metode, kas nepieciešama shēmas atkārtojamībai.Starp ārstēšanas indikācijām nav skaidras vienprātības, tāpēc ir grūti salīdzināt PRP produktus un ar tiem saistītos ārstēšanas rezultātus.Vairumā ziņoto gadījumu trombocītu koncentrācijas terapija ir klasificēta ar terminu “PRP”, pat attiecībā uz to pašu klīnisko indikāciju.Dažās medicīnas jomās (piemēram, OA un tendinoze) ir panākts progress, lai izprastu PRP preparātu izmaiņas, ievadīšanas ceļus, trombocītu funkciju un citus PRP komponentus, kas ietekmē audu atjaunošanos un audu reģenerāciju.Tomēr ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai panāktu vienprātību par PRP terminoloģiju saistībā ar PRP bioloģiskajiem aģentiem, lai pilnībā un droši ārstētu noteiktas patoloģijas un slimības.
PRP klasifikācijas sistēmas statuss
Autologās PRP bioterapijas izmantošanu apgrūtina PRP preparātu neviendabīgums, nekonsekventa nosaukumu piešķiršana un uz pierādījumiem balstītu vadlīniju slikta standartizācija (tas ir, ir daudz sagatavošanas metožu klīniskās ārstēšanas flakonu ražošanai).Var paredzēt, ka PRP un saistīto produktu absolūtais PRP saturs, tīrība un bioloģiskās īpašības ļoti atšķiras, un tas ietekmē bioloģisko efektivitāti un klīnisko pētījumu rezultātus.PRP sagatavošanas ierīces izvēle ievieš pirmo galveno mainīgo.Klīniskajā reģeneratīvajā medicīnā praktiķi var izmantot divas dažādas PRP sagatavošanas iekārtas un metodes.Preparātam tiek izmantots standarta asins šūnu separators, kas iedarbojas uz paša savāktajām pilnajām asinīm.Šajā metodē tiek izmantota nepārtrauktas plūsmas centrifūgas cilindra vai diska atdalīšanas tehnoloģija un cietās un mīkstās centrifūgas soļi.Lielākā daļa šo ierīču tiek izmantotas ķirurģijā.Vēl viena metode ir izmantot gravitācijas centrbēdzes tehnoloģiju un aprīkojumu.Augsta G spēka centrifugēšana tiek izmantota, lai atdalītu dzelteno ESR slāni no asins vienības, kurā ir trombocīti un baltās asins šūnas.Šīs koncentrācijas ierīces ir mazākas par asins šūnu separatoriem, un tās var izmantot blakus gultai.Atšķirībā ģ – Spēks un centrifugēšanas laiks rada būtiskas atšķirības izolēto trombocītu iznākumā, koncentrācijā, tīrībā, dzīvotspējā un aktivētajā stāvoklī.Pēdējā kategorijā var izmantot daudzus komerciālo PRP sagatavošanas iekārtu veidus, kā rezultātā tiek veiktas turpmākas produkta satura izmaiņas.
Vienprātības trūkums par sagatavošanas metodi un PRP validāciju turpina izraisīt PRP ārstēšanas nekonsekvenci, un pastāv milzīgas atšķirības PRP sagatavošanā, paraugu kvalitātē un klīniskajos rezultātos.Esošā komerciālā PRP iekārta ir pārbaudīta un reģistrēta saskaņā ar patentētā ražotāja specifikācijām, kas atrisina dažādus mainīgos lielumus starp pašlaik pieejamajām PRP iekārtām.
Izprotiet trombocītu devu in vitro un in vivo
PRP un citu trombocītu koncentrātu terapeitiskā iedarbība izriet no dažādu faktoru atbrīvošanās, kas ir iesaistīti audu atjaunošanā un atjaunošanā.Pēc trombocītu aktivācijas trombocīti veidos trombocītu trombu, kas kalpos kā pagaidu ekstracelulāra matrica, lai veicinātu šūnu proliferāciju un diferenciāciju.Tāpēc ir taisnīgi pieņemt, ka lielāka trombocītu deva izraisīs augstāku trombocītu bioaktīvo faktoru lokālo koncentrāciju.Tomēr korelācija starp devu un trombocītu koncentrāciju un atbrīvotā trombocītu bioaktīvā augšanas faktora un zāļu koncentrāciju var būt nekontrolējama, jo starp atsevišķiem pacientiem pastāv būtiskas atšķirības trombocītu skaita sākotnējā līmenī, kā arī atšķirības starp PRP sagatavošanas metodēm.Līdzīgi vairāki trombocītu augšanas faktori, kas iesaistīti audu remonta mehānismā, atrodas PRP plazmas daļā (piemēram, aknu augšanas faktors un insulīnam līdzīgais augšanas faktors 1).Tāpēc lielāka trombocītu deva neietekmēs šo augšanas faktoru atjaunošanās potenciālu.
In vitro PRP pētījumi ir ļoti populāri, jo dažādos parametrus šajos pētījumos var precīzi kontrolēt un rezultātus iegūt ātri.Vairāki pētījumi ir parādījuši, ka šūnas reaģē uz PRP atkarībā no devas.Nguyen un Pham parādīja, ka ļoti augstas GF koncentrācijas ne vienmēr veicināja šūnu stimulācijas procesu, kas varētu būt neproduktīvs.Daži in vitro pētījumi ir parādījuši, ka lielai PGF koncentrācijai var būt nelabvēlīga ietekme.Viens no iemesliem var būt ierobežotais šūnu membrānas receptoru skaits.Tāpēc, ja PGF līmenis ir pārāk augsts salīdzinājumā ar pieejamajiem receptoriem, tiem būs negatīva ietekme uz šūnu darbību.
Trombocītu koncentrācijas datu nozīme in vitro
Lai gan pētījumiem in vitro ir daudz priekšrocību, tai ir arī daži trūkumi.In vitro, pateicoties nepārtrauktai mijiedarbībai starp daudziem dažādiem šūnu tipiem jebkurā audos audu struktūras un šūnu audu dēļ, ir grūti replicēties in vitro divdimensiju vienas kultūras vidē.Šūnu blīvums, kas var ietekmēt šūnu signāla ceļu, parasti ir mazāks par 1% no audu stāvokļa.Divdimensiju kultūras šķīvja audi neļauj šūnām tikt pakļautām ārpusšūnu matricai (ECM).Turklāt tipiskā kultivēšanas tehnoloģija izraisīs šūnu atkritumu uzkrāšanos un nepārtrauktu barības vielu patēriņu.Tāpēc in vitro kultūra atšķiras no jebkura līdzsvara stāvokļa, audu skābekļa piegādes vai pēkšņas barotnes apmaiņas, un ir publicēti pretrunīgi rezultāti, salīdzinot PRP klīnisko iedarbību ar specifisku šūnu, audu tipu un trombocītu in vitro pētījumiem. koncentrācijas.Graziani un citi.Tika konstatēts, ka in vitro vislielākā ietekme uz osteoblastu un fibroblastu proliferāciju tika sasniegta pie PRP trombocītu koncentrācijas, kas 2,5 reizes pārsniedz sākotnējo vērtību.Turpretim Parka un kolēģu sniegtie klīniskie dati parādīja, ka pēc mugurkaula saplūšanas PRP trombocītu līmenis ir jāpalielina vairāk nekā 5 reizes nekā sākotnējais, lai radītu pozitīvus rezultātus.Tika ziņots arī par līdzīgiem pretrunīgiem rezultātiem starp cīpslu proliferācijas datiem in vitro un klīniskajiem rezultātiem.
(Šī raksta saturs tiek atkārtoti izdrukāts, un mēs nesniedzam nekādas tiešas vai netiešas garantijas par šajā rakstā ietvertā satura precizitāti, uzticamību vai pilnīgumu, un mēs neesam atbildīgi par šī raksta viedokļiem, lūdzu, saprotiet.)
Ievietošanas laiks: Mar-01-2023