page_banner

Jauna izpratne par trombocītiem bagātas plazmas (PRP) terapiju — II daļa

Mūsdienu PRP: "klīniskā PRP"

Pēdējo 10 gadu laikā PRP ārstēšanas shēma ir piedzīvojusi lielas izmaiņas.Izmantojot eksperimentālos un klīniskos pētījumus, mēs tagad labāk izprotam trombocītu un citu šūnu fizioloģiju.Turklāt vairāki augstas kvalitātes sistemātiski novērtējumi, metaanalīzes un randomizēti kontrolēti pētījumi ir parādījuši PRP biotehnoloģijas efektivitāti daudzās medicīnas jomās, tostarp dermatoloģijā, sirds ķirurģijā, plastiskā ķirurģijā, ortopēdiskajā ķirurģijā, sāpju ārstēšanā, mugurkaula slimībās un sporta medicīnā. .

Pašreizējā PRP īpašība ir tā absolūtā trombocītu koncentrācija, kas mainās no sākotnējās PRP definīcijas (ieskaitot trombocītu koncentrāciju, kas ir augstāka par sākotnējo vērtību) līdz vairāk nekā 1 × 10 6/µL jeb apmēram 5 reizes lielākai par minimālo trombocītu koncentrāciju trombocītos no plkst. bāzes līnija.Plašajā Fadadu et al.Tika novērtētas 33 PRP sistēmas un protokoli.Dažu no šīm sistēmām ražotā galīgā PRP preparāta trombocītu skaits ir mazāks nekā asinīs.Viņi ziņoja, ka PRP trombocītu faktors palielinājās līdz 0,52, izmantojot vienu griešanās komplektu (Selphyl®).Turpretim divkāršās rotācijas EmCyte Genesis PurePRPII ® Ierīces radītā trombocītu koncentrācija ir visaugstākā (1,6 × 10 6 /µL) .

Acīmredzot in vitro un dzīvnieku metodes nav ideāla pētniecības vide veiksmīgai pārveidei klīniskajā praksē.Tāpat arī ierīču salīdzināšanas pētījums neatbalsta lēmumu, jo tie parāda, ka trombocītu koncentrācija starp PRP ierīcēm ir ļoti atšķirīga.Par laimi, izmantojot proteomiku balstītas tehnoloģijas un analīzi, mēs varam palielināt savu izpratni par šūnu funkcijām PRP, kas ietekmē ārstēšanas rezultātus.Pirms tiek panākta vienprātība par standartizētiem PRP preparātiem un preparātiem, PRP ir jāievēro klīniskie PRP preparāti, lai veicinātu būtiskus audu atjaunošanas mehānismus un progresējošus klīniskos rezultātus.

 

Klīniskā PRP formula

Pašlaik efektīva klīniskā PRP (C-PRP) ir raksturota kā komplekss autologu daudzšūnu komponentu sastāvs neliela tilpuma plazmā, kas iegūts no perifēro asiņu daļas pēc centrifugēšanas.Pēc centrifugēšanas PRP un tā netrombocītu šūnu komponentus var atgūt no koncentrācijas ierīces atbilstoši dažādiem šūnu blīvumiem (no kuriem trombocītu blīvums ir viszemākais).

Klīnika-PRP

Izmantojiet PurePRP-SP ® Šūnu blīvuma atdalīšanas iekārtas (EmCyte Corporation, Fortmaijersa, FL, ASV) pēc divām centrifugēšanas procedūrām tika izmantotas pilnām asinīm.Pēc pirmā centrifugēšanas procesa visu asiņu komponents tika sadalīts divos pamata slāņos, trombocītu (liesās) plazmas suspensijā un sarkano asins šūnu slānī.A daļā otrais centrifugēšanas posms ir pabeigts.Faktisko PRP tilpumu var iegūt pacienta lietošanai.Palielinājums B parāda, ka iekārtas apakšā ir sakārtots daudzkomponentu eritrocītu sedimentācijas brūnais slānis (attēlots ar zilu līniju), kas satur augstu trombocītu, monocītu un limfocītu koncentrāciju, pamatojoties uz blīvuma gradientu.Šajā piemērā saskaņā ar C-PRP sagatavošanas protokolu ar vājiem neitrofiliem tiks ekstrahēts minimālais neitrofilu (<0,3%) un eritrocītu (<0,1%) procentuālais daudzums.

 

Trombocītu granulas

Agrīnā klīniskā PRP lietojumā α-granulas ir visbiežāk citētā trombocītu iekšējā struktūra, jo tās satur koagulācijas faktorus, lielu skaitu PDGF un angiogēno regulatoru, bet tām ir maza trombogēna funkcija.Citi faktori ir mazāk zināmi ķīmokīnu un citokīnu komponenti, piemēram, trombocītu faktors 4 (PF4), pirmstrombocītu bāzes proteīns, P-selektīns (integrīna aktivators) un ķīmokīns RANTES (regulē aktivācija, ekspresē normālas T šūnas un, iespējams, sekrēcija).Šo specifisko trombocītu granulu komponentu vispārējā funkcija ir piesaistīt un aktivizēt citas imūnās šūnas vai izraisīt endotēlija šūnu iekaisumu.

Trombocīti-granulas

 

Blīvi granulēti komponenti, piemēram, ADP, serotonīns, polifosfāts, histamīns un adrenalīns, tiek netiešāk izmantoti kā trombocītu aktivācijas un trombozes regulatori.Vissvarīgākais ir tas, ka daudziem no šiem elementiem ir imūnsistēmas šūnu modificēšanas funkcija.Trombocītu ADP atpazīst P2Y12ADP receptors uz dendritiskajām šūnām (DC), tādējādi palielinot antigēna endocitozi.DC (antigēnu prezentējošā šūna) ir ļoti svarīga, lai ierosinātu T šūnu imūnreakciju un kontrolētu aizsargājošu imūnreakciju, kas savieno iedzimto imūnsistēmu un adaptīvo imūnsistēmu.Turklāt trombocītu adenozīna trifosfāts (ATP) sūta signālus caur T šūnu receptoru P2X7, kas palielina CD4 T palīgšūnu diferenciāciju proinflammatoriskās T helper 17 (Th17) šūnās.Citas trombocītu blīvās granulu sastāvdaļas (piemēram, glutamāts un serotonīns) attiecīgi izraisa T šūnu migrāciju un palielina monocītu diferenciāciju līdz DC.PRP šie imūnmodulatori, kas iegūti no blīvām daļiņām, ir ļoti bagātināti un tiem ir būtiskas imūnās funkcijas.

Tiešo un netiešo iespējamo mijiedarbību skaits starp trombocītiem un citām (receptoru) šūnām ir plašs.Tāpēc PRP lietošana vietējā patoloģiskajā audu vidē var izraisīt dažādus iekaisuma efektus.

 

Trombocītu koncentrācija

C-PRP jāsatur koncentrētu trombocītu klīniskās devas, lai radītu labvēlīgu terapeitisko efektu.Trombocītiem C-PRP vajadzētu stimulēt šūnu proliferāciju, mezenhimālo un neirotrofisko faktoru sintēzi, veicināt ķīmijtaktisko šūnu migrāciju un stimulēt imūnregulācijas aktivitāti, kā parādīts attēlā.Trombocītu koncentrācija

 

Aktivētie trombocīti, PGF izdalīšanās un adhēzijas molekulas veicina dažādas šūnu mijiedarbības: ķīmijaksi, šūnu adhēziju, migrāciju un šūnu diferenciāciju, kā arī regulē imūnsistēmas regulējošās aktivitātes.Šīs trombocītu šūnu un šūnu mijiedarbības veicina angiogenēzi un iekaisuma aktivitāti un galu galā stimulē audu atjaunošanas procesu.Saīsinājumi: BMA: kaulu smadzeņu aspirāts, EPC: endotēlija cilmes šūnas, EC: endotēlija šūnas, 5-HT: 5-hidroksitriptamīns, RANTES: aktivēta normālu T šūnu ekspresijas un iespējamās sekrēcijas regulēšana, JAM: savienojuma adhēzijas molekulas veids, CD40L: klasteris 40 ligands, SDF-1 α: Stromas šūnu faktors-1 α, CXCL: ķemokīna (CXC motīvs) ligands, PF4: trombocītu faktors 4. Pielāgots no Everts et al.

Markss bija pirmais, kurš pierādīja, ka ir uzlabojusies kaulu un mīksto audu dzīšana, un minimālais trombocītu skaits bija 1 × 10 6 /µL. Šie rezultāti tika apstiprināti pētījumā par jostas saplūšanu caur starpskriemeļu atveri, kad trombocītu deva bija lielāka par 1,3 × Pie 106 trombocītiem/µL šis pētījums parādīja lielāku saplūšanu.Turklāt Giusti et al.Atklāts 1, 5 × Audu atjaunošanas mehānismam 109 devā ir nepieciešami trombocīti / ml, lai ar endotēlija šūnu aktivitāti izraisītu funkcionālu angiogēzi.Pēdējā pētījumā augstākas koncentrācijas samazināja trombocītu angioģenēzes potenciālu folikulos un ap tiem.Turklāt iepriekšējie dati liecināja, ka PRP deva ietekmēs arī ārstēšanas rezultātus.Tāpēc, lai būtiski izraisītu angiogēzes reakciju un stimulētu šūnu proliferāciju un šūnu migrāciju, C-PRP jāsatur vismaz 7,5 5 ml PRP apstrādes pudelē × 10 9 var piegādāt trombocītus.

Papildus atkarībai no devas, šķiet, ka PRP ietekme uz šūnu aktivitāti ir ļoti atkarīga no laika.Sofija et al.Šie rezultāti liecina, ka īslaicīga cilvēka trombocītu lizātu iedarbība var stimulēt kaulu šūnu proliferāciju un ķīmijaksi.Gluži pretēji, ilgstoša PRP iedarbība novedīs pie zemāka sārmainās fosfatāzes un minerālvielu veidošanās līmeņa.

 

Sarkanās asins šūnas

Sarkanās asins šūnas ir atbildīgas par skābekļa transportēšanu uz audiem un oglekļa dioksīda pārnešanu no audiem uz plaušām.Viņiem nav kodola, un tie sastāv no hema molekulām, kas saistās ar olbaltumvielām.Dzelzs un hema komponenti sarkanajās asins šūnās veicina skābekļa un oglekļa dioksīda kombināciju.Parasti sarkano asins šūnu dzīves cikls ir aptuveni 120 dienas.Tos no asinsrites izņem makrofāgi, izmantojot procesu, ko sauc par RBC novecošanos.Sarkanās asins šūnas PRP paraugos var tikt bojātas bīdes apstākļos (piemēram, pilnas asins asiņošanas operācija, imūnsistēmas process, oksidatīvais stress vai neatbilstoša PRP koncentrācijas shēma).Tāpēc RBC šūnu membrāna sadalās un izdala toksisku hemoglobīnu (Hb), ko mēra ar plazmas brīvo hemoglobīnu (PFH), hemu un dzelzi.].PFH un tā noārdīšanās produkti (hēms un dzelzs) kopīgi izraisa kaitīgu un citotoksisku ietekmi uz audiem, izraisot oksidatīvo stresu, slāpekļa oksīda zudumu, iekaisuma ceļu aktivāciju un imūnsupresiju.Šīs sekas galu galā izraisīs mikrocirkulācijas disfunkciju, lokālu vazokonstrikciju un asinsvadu bojājumus, kā arī nopietnus audu bojājumus.

Vissvarīgākais ir tas, ka, nogādājot C-PRP saturošus RBC audos, tas izraisīs lokālu reakciju, ko sauc par eriptozi, kas izraisīs efektīva citokīnu un makrofāgu migrācijas inhibitora izdalīšanos.Šis citokīns kavē monocītu un makrofāgu migrāciju.Tas rada spēcīgus pro-iekaisuma signālus uz apkārtējiem audiem, kavē cilmes šūnu migrāciju un fibroblastu proliferāciju, kā arī izraisa ievērojamu lokālu šūnu disfunkciju.Tāpēc ir svarīgi ierobežot eritrocītu piesārņojumu PRP preparātos.Turklāt sarkano asins šūnu loma audu reģenerācijā nekad nav noteikta.Adekvāta C-PRP centrifugēšana un sagatavošanas process parasti samazinās vai pat izslēgs sarkano asins šūnu klātbūtni, tādējādi izvairoties no hemolīzes un policitēmijas nelabvēlīgajām sekām.

 

Leikocīti C-PRP

Balto asinsķermenīšu klātbūtne PRP preparātos ir atkarīga no apstrādes iekārtas un sagatavošanas shēmas.Plazmas PRP iekārtās baltās asins šūnas tiek pilnībā izvadītas;Tomēr baltās asins šūnas tika ievērojami koncentrētas eritrocītu sedimentācijas brūnā slāņa PRP preparātā.Pateicoties imūnsistēmas un saimnieka aizsardzības mehānismiem, baltās asins šūnas lielā mērā ietekmē akūtu un hronisku audu stāvokļu iekšējo bioloģiju.Šīs funkcijas tiks apspriestas tālāk.Tāpēc specifisku leikocītu klātbūtne C-PRP var izraisīt ievērojamu ietekmi uz šūnām un audiem.Konkrētāk, dažādās PRP eritrocītu sedimentācijas brūni dzeltenā slāņa sistēmās tiek izmantotas dažādas sagatavošanas shēmas, tādējādi PRP veidojot atšķirīgu neitrofilu, limfocītu un monocītu proporciju.Eozinofilus un bazofilus nevar izmērīt PRP preparātos, jo to šūnu membrānas ir pārāk trauslas, lai izturētu centrbēdzes apstrādes spēkus.

 

Neitrofīli

Neitrofīli ir būtiski leikocīti daudzos dziedināšanas ceļos.Šie ceļi apvienojas ar pretmikrobu proteīniem, kas atrodas trombocītos, veidojot blīvu barjeru pret invazīviem patogēniem.Neitrofilu esamību nosaka saskaņā ar C-PRP ārstēšanas mērķi.Hroniskas brūču kopšanas PRP bioterapijā vai lietojumos, kuru mērķis ir kaulu augšana vai dzīšana, var būt nepieciešams paaugstināts audu iekaisuma līmenis.Svarīgi, ka vairākos modeļos ir atrastas papildu neitrofilu funkcijas, uzsverot to lomu angiogenēzē un audu atjaunošanā.Tomēr neitrofīli var izraisīt arī kaitīgu ietekmi, tāpēc tie nav piemēroti dažiem lietojumiem.Džou un Vans pierādīja, ka ar neitrofiliem bagāta PRP izmantošana var izraisīt III tipa kolagēna un I tipa kolagēna attiecības palielināšanos, tādējādi saasinot fibrozi un samazinot cīpslu izturību.Citas kaitīgas īpašības, ko izraisa neitrofīli, ir iekaisuma citokīnu un matricas metaloproteināžu (MMP) izdalīšanās, kas var veicināt iekaisumu un katabolismu, ja to lieto audos.

 

Leikomonocīti

C-PRP mononukleārie T un B limfocīti ir koncentrētāki nekā jebkuras citas baltās asins šūnas.Tie ir cieši saistīti ar šūnu mediētu citotoksisku adaptīvo imunitāti.Limfocīti var izraisīt šūnu reakcijas, lai cīnītos ar infekciju un pielāgotos iebrucējiem.Turklāt no T-limfocītiem iegūtie citokīni (interferons-γ [IFN-γ] un interleikīns-4 (IL-4) pastiprina makrofāgu polarizāciju. Verassar et al. Ir pierādīts, ka parastie T limfocīti var netieši veicināt audu dzīšanu peles modeli, regulējot monocītu un makrofāgu diferenciāciju.

 

Monocīts – daudzpotenta remonta šūna

Atbilstoši izmantotajai PRP sagatavošanas ierīcei monocīti PRP apstrādes pudelē var izvirzīties uz āru vai nebūt.Diemžēl literatūrā to veiktspēja un reģenerācijas spēja tiek apspriesta reti.Tāpēc sagatavošanas metodē vai galīgajā formulā monocītiem tiek pievērsta maza uzmanība.Monocītu grupa ir neviendabīga, izcelsme no cilmes šūnām kaulu smadzenēs un tiek transportēta uz perifērajiem audiem caur hematopoētisko cilmes šūnu ceļu saskaņā ar mikrovides stimulāciju.Homeostāzes un iekaisuma laikā cirkulējošie monocīti iziet no asinsrites un tiek piesaistīti ievainotiem vai degradētiem audiem.Tās var darboties kā makrofāgi (M Φ) efektoršūnas vai cilmes šūnas.Monocīti, makrofāgi un dendrītiskās šūnas pārstāv mononukleāro fagocītu sistēmu (MPS). Tipiska MPS iezīme ir tās gēnu ekspresijas modeļa plastiskums un šo šūnu tipu funkcionālā pārklāšanās.Deģenerētos audos rezidenti makrofāgi, lokāli iedarbīgi augšanas faktori, pro-iekaisuma citokīni, apoptotiskas vai nekrotiskas šūnas un mikrobu produkti ierosina monocītus diferencēt MPS šūnu grupās.Pieņemsim, ka, ievadot C-PRP saturošus augstas ražības monocītus slimības lokālajā mikrovidē, monocīti, visticamāk, diferencēsies par M Φ, lai izraisītu lielas šūnu izmaiņas.

No monocīta līdz M Φ Transformācijas procesā specifisks M Φ Fenotips.Pēdējo desmit gadu laikā ir izstrādāts modelis, kas integrē M Φ Sarežģītais aktivācijas mehānisms ir aprakstīts kā divu pretēju stāvokļu polarizācija: M Φ 1. fenotips (M Φ 1, klasiskā aktivācija) un M Φ 2. fenotips (M Φ). 2, alternatīva aktivizēšana).M Φ 1 raksturo iekaisuma citokīnu sekrēcija (IFN-γ) un slāpekļa oksīds, lai radītu efektīvu patogēnu iznīcināšanas mehānismu.M Φ Fenotips rada arī asinsvadu endotēlija augšanas faktoru (VEGF) un fibroblastu augšanas faktoru (FGF).M Φ Fenotips sastāv no pretiekaisuma šūnām ar augstu fagocitozi.M Φ 2 Izgatavo ārpusšūnu matricas komponentus, angiogenēzi un ķīmokīnus, kā arī interleikīnu 10 (IL-10).Papildus patogēnu aizsardzībai M Φ Tas var arī samazināt iekaisumu un veicināt audu atjaunošanos.Jāatzīmē, ka M Φ 2 ir iedalīts M in vitro Φ 2a、M Φ 2b un M Φ 2. Tas ir atkarīgs no stimula.Šo apakštipu tulkošana in vivo ir sarežģīta, jo audos var būt jauktas M Φ grupas.Interesanti, ka, pamatojoties uz vietējiem vides signāliem un IL-4 līmeņiem, proinflammatorisko M Φ 1 var pārveidot, lai veicinātu atjaunošanos M Φ 2。 No šiem datiem ir pamatoti pieņemt, ka ir augsta monocītu un M Φ C-PRP preparātu koncentrācija. var veicināt labāku audu atjaunošanos, jo tiem piemīt pretiekaisuma audu atjaunošanas un šūnu signālu pārraides spējas.

 

Neskaidra balto asins šūnu frakcijas definīcija PRP

Balto asinsķermenīšu klātbūtne PRP apstrādes pudelēs ir atkarīga no PRP sagatavošanas ierīces, un tai var būt būtiskas atšķirības.Ir daudz strīdu par leikocītu esamību un to ieguldījumu dažādos sub-PRP produktos (piemēram, PRGF, P-PRP, LP-PRP, LR-PRP, P-PRF un L-PRF). kontrolētos pētījumos (1. pierādījumu līmenis) un trīs prospektīvos salīdzinošajos pētījumos (2. pierādījumu līmenis) piedalījās 1055 pacienti, kas liecina, ka LR-PRP un LP-PRP drošība bija līdzīga.Autore secināja, ka PRP nevēlamā reakcija var nebūt tieši saistīta ar balto asins šūnu koncentrāciju.Citā pētījumā LR-PRP nemainīja iekaisuma interleikīnu (IL-1) OA ceļgala β、 IL-6, IL-8 un IL-17).Šie rezultāti apstiprina uzskatu, ka leikocītu loma PRP bioloģiskajā aktivitātē in vivo var rasties no trombocītu un leikocītu šķērsrunas.Šī mijiedarbība var veicināt citu faktoru (piemēram, lipskābekļa) biosintēzi, kas var kompensēt vai veicināt iekaisuma regresiju.Pēc sākotnējās iekaisuma molekulu (arahidonskābes, leikotriēna un prostaglandīna) atbrīvošanās no aktivētajiem trombocītiem tiek atbrīvots lipoksigēns A4, lai novērstu neitrofilu aktivāciju.Tieši šajā vidē M Φ fenotips no M Φ 1 pāriet uz M Φ 2。 Turklāt arvien vairāk pierādījumu liecina, ka cirkulējošās mononukleārās šūnas to pluripotences dēļ var diferencēties dažādos nefagocītiskos šūnu veidos.

PRP veids ietekmēs MSC kultūru.Salīdzinot ar tīriem PRP vai PPP paraugiem, LR-PRP var izraisīt ievērojami lielāku kaulu smadzenēs iegūto MSC (BMMSC) proliferāciju ar ātrāku izdalīšanos un labāku PGF bioloģisko aktivitāti.Visas šīs īpašības veicina monocītu pievienošanu PRP ārstēšanas pudelē un to imūnmodulējošās spējas un diferenciācijas potenciāla atpazīšanu.

 

Iedzimta un adaptīva PRP imūnregulācija

Slavenākā trombocītu fizioloģiskā funkcija ir asiņošanas kontrole.Tie uzkrājas audu bojājuma vietā un bojātajos asinsvados.Šos notikumus izraisa integrīnu un selektīnu ekspresija, kas stimulē trombocītu adhēziju un agregāciju.Bojātais endotēlijs vēl vairāk pasliktina šo procesu, un atklātais kolagēns un citi subendotēlija matricas proteīni veicina trombocītu dziļu aktivāciju.Šajos gadījumos ir pierādīta fon Vilebranda faktora (vWF) un glikoproteīna (GP), īpaši GP-Ib, mijiedarbības svarīgā loma.Pēc trombocītu aktivācijas trombocītu α-、 blīvās, lizosomu un T-granulas regulē eksocitozi un izdala to saturu ārpusšūnu vidē.

 

Trombocītu adhēzijas molekula

Lai labāk izprastu PRP lomu iekaisuma audos un trombocītos imūnās atbildes reakcijā, mums vajadzētu saprast, kā dažādi trombocītu virsmas receptori (integrīni) un savienojuma adhēzijas molekulas (JAM) un šūnu mijiedarbība var ierosināt kritiskus procesus iedzimtajā un adaptīvajā imunitātē.

Integrīni ir šūnu virsmas adhēzijas molekulas, kas atrodamas dažādos šūnu veidos un lielos daudzumos izteiktas trombocītos.Integrīni ietver a5b1, a6b1, a2b1 LFA-2, (GPIa/IIa) un aIIbb3 (GPIIb/IIIa).Parasti tie pastāv statiskā un zemas afinitātes stāvoklī.Pēc aktivācijas tie pāriet uz augstas ligandu saistīšanās afinitātes stāvokli.Integrīniem ir dažādas funkcijas uz trombocītiem un tie piedalās trombocītu mijiedarbībā ar vairāku veidu baltajām asins šūnām, endotēlija šūnām un ekstracelulāro matricu.Turklāt GP-Ib-V-IX komplekss tiek ekspresēts uz trombocītu membrānas un ir galvenais receptors saistīšanai ar von vWF.Šī mijiedarbība veicina sākotnējo kontaktu starp trombocītiem un atklātām subendotēlija struktūrām.Trombocītu integrīns un GP komplekss ir saistīti ar dažādiem iekaisuma procesiem un tiem ir svarīga loma trombocītu-leikocītu kompleksa veidošanā.Konkrēti, integrīns aIIbb3 ir nepieciešams, lai izveidotu stabilu kompleksu, apvienojot fibrinogēnu ar makrofāgu 1 antigēna (Mac-1) receptoru uz neitrofiliem.

Trombocīti, neitrofīli un asinsvadu endotēlija šūnas ekspresē specifiskas šūnu adhēzijas molekulas, ko sauc par selektīnu.Iekaisuma apstākļos trombocīti ekspresē P-selektīnu un neitrofilu L-selektīnu.Pēc trombocītu aktivācijas P-selektīns var saistīties ar ligandu PSGL-1, kas pastāv uz neitrofiliem un monocītiem.Turklāt PSGL-1 saistīšanās ierosina intracelulāro signālu kaskādes reakciju, kas aktivizē neitrofilus caur neitrofilu integrīnu Mac-1 un ar limfocītu funkciju saistīto antigēnu 1 (LFA-1).Aktivētais Mac-1 saistās ar GPIb vai GPIIb/IIIa uz trombocītiem caur fibrinogēnu, tādējādi stabilizējot mijiedarbību starp neitrofiliem un trombocītiem.Turklāt aktivēto LFA-1 var apvienot ar trombocītu starpšūnu adhēzijas molekulu 2, lai vēl vairāk stabilizētu neitrofilu-trombocītu kompleksu, lai veicinātu ilgstošu adhēziju ar šūnām.

 

Trombocīti un leikocīti spēlē galveno lomu iedzimtajās un adaptīvajās imūnās reakcijās

Ķermenis var atpazīt svešķermeņus un ievainotus audus akūtu vai hronisku slimību gadījumā, lai uzsāktu brūču dzīšanas kaskādes reakciju un iekaisuma ceļu.Iedzimtās un adaptīvās imūnsistēmas aizsargā saimniekorganismu no infekcijas, un baltajām asins šūnām ir svarīga loma abu sistēmu pārklāšanās procesā.Konkrēti, monocītiem, makrofāgiem, neitrofiliem un dabīgām killer šūnām ir galvenā loma iedzimtajā sistēmā, savukārt limfocītiem un to apakšgrupām ir līdzīga loma adaptīvajā imūnsistēmā.

Trombocīti un leikocīti

 

Trombocītu un leikocītu mijiedarbība iedzimto imūno šūnu mijiedarbībā.Trombocīti mijiedarbojas ar neitrofiliem un monocītiem un, visbeidzot, ar M Φ Mijiedarbojas, pielāgo un palielina to efektoru funkcijas.Šīs trombocītu un leikocītu mijiedarbības izraisa iekaisumu, izmantojot dažādus mehānismus, tostarp NETosis.Saīsinājumi: MPO: mieloperoksidāze, ROS: reaktīvās skābekļa sugas, TF: audu faktors, NET: neitrofilu ekstracelulārais slazds, NF-κ B: kodolfaktors kappa B, M Φ: makrofāgi.

 

Iedzimta imūnsistēma

Iedzimtas imūnsistēmas uzdevums ir nespecifiski identificēt invazīvus mikroorganismus vai audu fragmentus un stimulēt to klīrensu.Kad noteiktas molekulārās struktūras, ko sauc par virsmas ekspresijas modeļa atpazīšanas receptoriem (PRR), apvienojas ar patogēniem saistītiem molekulāriem modeļiem un ar bojājumiem saistītiem molekulāriem modeļiem, tiks aktivizēta iedzimta imūnsistēma.Ir daudz veidu PRR, tostarp Toll-like receptors (TLR) un RIG-1 līdzīgi receptori (RLR).Šie receptori var aktivizēt galveno transkripcijas faktoru kappa B (NF-κ B). Tas arī regulē vairākus iedzimtas un adaptīvās imūnās atbildes aspektus.Interesanti, ka trombocīti uz savas virsmas un citoplazmas ekspresē arī dažādas imūnregulācijas receptoru molekulas, piemēram, P-selektīnu, transmembrānu proteīna CD40 ligandu (CD40L), citokīnus (piemēram, IL-1 β、 TGF- β) un trombocītiem specifisku TLR). Tāpēc trombocīti var mijiedarboties ar dažādām imūnsistēmas šūnām.

 

Trombocītu un balto šūnu mijiedarbība iedzimtajā imunitātē

Kad trombocīti iekļūst vai iekļūst asinsritē vai audos, trombocīti ir viena no šūnām, kas vispirms atklāj endotēlija bojājumus un mikrobu patogēnus.Trombocītu agregācija un veicina trombocītu agonistu ADP, trombīna un vWF izdalīšanos, kā rezultātā notiek trombocītu aktivācija un trombocītu ķīmokīna receptoru C, CC, CXC un CX3C ekspresija, tādējādi izraisot trombocītu veidošanos inficētajā vietā vai traumu.

Iedzimtā imūnsistēma ir ģenētiski iepriekš noteikta, lai atklātu iebrucējus, piemēram, vīrusus, baktērijas, parazītus un toksīnus vai audu brūces un brūces.Tā ir nespecifiska sistēma, jo jebkurš patogēns tiks identificēts kā svešs vai ne-pašs un ātri atrasts.Iedzimtā imūnsistēma balstās uz proteīnu un fagocītu kopumu, kas atpazīst labi saglabājušās patogēnu īpašības un ātri aktivizē imūnreakciju, lai palīdzētu iznīcināt iebrucējus, pat ja saimnieks iepriekš nav bijis pakļauts konkrētiem patogēniem.

Neitrofīli, monocīti un dendrītiskās šūnas ir visizplatītākās iedzimtās imūnās šūnas asinīs.Viņu piesaistīšana ir nepieciešama adekvātai agrīnai imūnās atbildes reakcijai.Ja PRP izmanto reģeneratīvajā medicīnā, trombocītu un balto šūnu mijiedarbība regulē iekaisumu, brūču dzīšanu un audu atjaunošanos.TLR-4 uz trombocītiem stimulē trombocītu un neitrofilu mijiedarbību, kas regulē tā saukto leikocītu oksidatīvo sprādzienu, regulējot reaktīvo skābekļa sugu (ROS) un mieloperoksidāzes (MPO) izdalīšanos no neitrofiliem.Turklāt mijiedarbība starp trombocītu-neitrofilu un neitrofilu degranulāciju izraisa neitrofilu-ekstracelulāro slazdu (NET) veidošanos.NET sastāv no neitrofilu kodola un cita neitrofilu intracelulāra satura, kas var uztvert baktērijas un nogalināt tās, izmantojot NETosis.NET veidošanās ir būtisks neitrofilu nogalināšanas mehānisms.

Pēc trombocītu aktivācijas monocīti var migrēt uz slimiem un deģeneratīviem audiem, kur tie veic adhēzijas aktivitātes un izdala iekaisuma molekulas, kas var mainīt ķīmijaksi un proteolītiskās īpašības.Turklāt trombocīti var izraisīt monocītu NF-κ B aktivāciju, lai regulētu monocītu efektora funkciju, kas ir galvenais iekaisuma reakcijas un imūno šūnu aktivācijas un diferenciācijas mediators.Trombocīti vēl vairāk veicina monocītu endogēno oksidatīvo uzliesmojumu, lai veicinātu fagocītu patogēnu iznīcināšanu.MPO izdalīšanos veicina tieša mijiedarbība starp trombocītu-monocītu CD40L-MAC-1.Interesanti, ka, kad P-selektīns aktivizē trombocītus akūtu un hronisku iekaisuma audu apstākļos, no trombocītiem iegūtie ķīmokīni PF4, RANTES, IL-1 β un CXCL-12 var novērst spontānu monocītu apoptozi, bet veicināt to diferenciāciju makrofāgos.

 

Adaptīvā imūnsistēma

Pēc tam, kad nespecifiskā iedzimtā imūnsistēma atpazīst mikrobu vai audu bojājumus, specifiskā adaptīvā imūnsistēma pārņems.Adaptīvās sistēmas ietver antigēnu saistošos B limfocītus (B šūnas) un parastos T limfocītus (Treg), kas koordinē patogēnu klīrensu.T šūnas var aptuveni iedalīt T palīgšūnās (Th šūnas) un citotoksiskās T šūnās (Tc šūnas, kas pazīstamas arī kā T killer šūnas).Th šūnas tālāk tiek sadalītas Th1, Th2 un Th17 šūnās, kurām ir galvenās funkcijas iekaisuma gadījumā.Th šūnas var izdalīt proinflammatoriskus citokīnus (piemēram, IFN-γ、 TNF-β) un vairākus interleikīnus (piem., IL-17). Tās ir īpaši efektīvas intracelulāras vīrusu un bakteriālas infekcijas profilaksē. Th šūnas stimulē to šūnu proliferāciju un diferenciāciju, kas iesaistītas Tc šūnas ir efektoršūnas, kas var likvidēt mērķa intracelulāros un ārpusšūnu mikroorganismus un šūnas.

Interesanti, ka Th2 šūnas ražo IL-4 un ietekmē M Φ polarizāciju, M Φ vadītu reģenerāciju M Φ 2 fenotipu, savukārt IFN- γ M Φ pāriet uz iekaisuma M Φ 1 fenotipu, kas ir atkarīgs no citokīnu devas un laika.Kad IL-4 ir aktivizēts, M Φ 2 izraisa Treg šūnu diferenciāciju par Th2 šūnām un pēc tam rada papildu IL-4 (pozitīvās atgriezeniskās saites cilpa).Th šūnas pārvērš M Φ Fenotips ir vērsts uz reģeneratīvo fenotipu, reaģējot uz audu izcelsmes bioloģiskajiem aģentiem.Šis mehānisms ir balstīts uz pierādījumiem, ka Th šūnām ir nozīmīga loma iekaisuma kontrolē un audu atjaunošanā.

 

Trombocītu un balto šūnu mijiedarbība adaptīvajā imunitātē

Adaptīvā imūnsistēma izmanto antigēniem specifiskus receptorus un atceras iepriekš sastaptos patogēnus un iznīcina tos, kad pēc tam saskaras ar saimniekorganismu.Tomēr šīs adaptīvās imūnās atbildes attīstījās lēni.Konias et al.Tas parāda, ka trombocītu komponents veicina riska uztveri un audu atjaunošanos un ka trombocītu un leikocītu mijiedarbība veicina adaptīvās imūnās atbildes aktivizēšanu.

Adaptīvās imūnās atbildes laikā trombocīti veicina monocītu un makrofāgu reakcijas, izmantojot DC un NK šūnu nobriešanu, izraisot specifiskas T šūnu un B šūnu reakcijas.Tāpēc trombocītu granulu komponenti tieši ietekmē adaptīvo imunitāti, ekspresējot CD40L, molekulu, kas ir būtiska adaptīvās imūnās atbildes regulēšanai.Trombocīti caur CD40L ne tikai spēlē lomu antigēna prezentācijā, bet arī ietekmē T šūnu reakciju.Liu et al.Tika konstatēts, ka trombocīti sarežģīti regulē CD4 T šūnu reakciju.Šī CD4 T šūnu apakšgrupu diferenciālā regulēšana nozīmē, ka trombocīti veicina CD4 T šūnu reakciju uz iekaisuma stimuliem, tādējādi radot spēcīgas pretiekaisuma un pretiekaisuma reakcijas.

Trombocīti regulē arī B šūnu izraisītu adaptīvo reakciju uz mikrobu patogēniem.Ir labi zināms, ka CD40L uz aktivizētām CD4 T šūnām aktivizēs B šūnu CD40, nodrošinot otro signālu, kas nepieciešams no T-šūnām atkarīgai B limfocītu aktivācijai, sekojošai allotipa konversijai un B šūnu diferenciācijai un proliferācijai.Kopumā rezultāti skaidri parāda trombocītu dažādās funkcijas adaptīvajā imunitātē, norādot, ka trombocīti savieno mijiedarbību starp T šūnām un B šūnām caur CD40-CD40L, tādējādi uzlabojot no T-šūnām atkarīgo B šūnu reakciju.Turklāt trombocīti ir bagāti ar šūnu virsmas receptoriem, kas var veicināt trombocītu aktivāciju un atbrīvot lielu skaitu iekaisuma un bioloģiski aktīvo molekulu, kas glabājas dažādās trombocītu daļiņās, tādējādi ietekmējot iedzimto un adaptīvo imūnreakciju.

 

Paplašināta trombocītu izcelsmes serotonīna loma PRP

Serotonīnam (5-hidroksitriptamīnam, 5-HT) ir nepārprotama galvenā loma centrālajā nervu sistēmā (CNS), tostarp sāpju tolerancē.Tiek lēsts, ka lielākā daļa cilvēka 5-HT tiek ražota kuņģa-zarnu traktā un pēc tam caur asinsriti, kur to absorbē trombocīti caur serotonīna atpakaļsaistes transporteri un uzglabā blīvās daļiņās augstā koncentrācijā (65 mmol/L).5-HT ir labi zināms neirotransmiters un hormons, kas palīdz regulēt dažādus neiropsiholoģiskos procesus CNS (centrālais 5-HT).Tomēr lielākā daļa 5-HT pastāv ārpus CNS (perifērā 5-HT), un tā ir iesaistīta vairāku orgānu sistēmu, tostarp sirds un asinsvadu, plaušu, kuņģa-zarnu trakta, uroģenitālās un trombocītu funkcionālo sistēmu, sistēmisko un šūnu bioloģisko funkciju regulēšanā.5-HT ir no koncentrācijas atkarīgs metabolisms dažādos šūnu veidos, tostarp adipocītos, epitēlija šūnās un baltās asins šūnās.Perifērais 5-HT ir arī spēcīgs imūnmodulators, kas var stimulēt vai inhibēt iekaisumu un ietekmēt dažādas imūnās šūnas, izmantojot tā specifisko 5-HT receptoru (5HTR).

 

HT parakrīns un autokrīns mehānisms

5-HT aktivitāti veicina tā mijiedarbība ar 5HTR, kas ir virsģimene ar septiņiem locekļiem (5-HT 1–7) un vismaz 14 dažādiem receptoru apakštipiem, tostarp nesen atklāto locekli 5-HT 7, tā perifēro un funkcija sāpju ārstēšanā.Trombocītu degranulācijas procesā aktivētie trombocīti izdala lielu skaitu no trombocītiem iegūta 5-HT, kas var veicināt asinsvadu kontrakciju un stimulēt blakus esošo trombocītu un limfocītu aktivāciju, ekspresējot 5-HTR uz endotēlija šūnām, gludo muskuļu šūnām un imūnās šūnas.Pacala et al.Tika pētīta 5-HT mitotiskā iedarbība uz asinsvadu endotēlija šūnām un noskaidrots potenciāls veicināt bojāto asinsvadu augšanu, stimulējot angiogēzi.Nav pilnībā skaidrs, kā šie procesi tiek regulēti, taču tas var ietvert diferencētus divvirzienu signālu ceļus audu mikroshēmā, lai regulētu asinsvadu endotēlija šūnu un gludās muskulatūras šūnu, fibroblastu un imūnšūnu funkcijas, izmantojot specifiskus 5-HT receptorus uz šīm šūnām. .Ir aprakstīta trombocītu 5-HT autokrīnā funkcija pēc trombocītu aktivācijas [REF].5-HT izdalīšanās uzlabo trombocītu aktivāciju un cirkulējošo trombocītu piesaisti, kā rezultātā tiek aktivizētas signālu kaskādes reakcijas un augšējie efektori, kas atbalsta trombocītu reaktivitāti.

 

Imūnmodulējoša 5-HT iedarbība

Arvien vairāk pierādījumu liecina, ka serotonīnam var būt nozīme dažādos 5HTR kā imūnmodulatoram.Saskaņā ar 5HTR, kas izteikts dažādos leikocītos, kas iesaistīti iekaisuma reakcijās, no trombocītiem iegūtais 5-HT darbojas kā imūnregulators gan iedzimtajā, gan adaptīvajā imūnsistēmā.5-HT var stimulēt Treg proliferāciju un regulēt B šūnu, dabisko killer šūnu un neitrofilu funkcijas, piesaistot DC un monocītus iekaisuma vietā.Nesenie pētījumi liecina, ka no trombocītiem iegūtais 5-HT var regulēt imūno šūnu darbību noteiktos apstākļos.Tāpēc, izmantojot C-PRP, trombocītu koncentrācija ir lielāka par 1 × 10 6/µL, var ievērojami palīdzēt transportēt 5-HT koncentrāciju, kas iegūta no lieliem trombocītiem, uz audiem.Mikrovidē, ko raksturo iekaisuma komponenti, PRP var mijiedarboties ar vairākām imūnās šūnām, kurām ir galvenā loma šajās patoloģijās, kas var ietekmēt klīniskos rezultātus.

Imūnmodulējoša-5-HT-efekts

Attēlā parādīta daudzpusīga 5-HT reakcija pēc iekaisīgo PRP trombocītu aktivizēšanas.Pēc trombocītu aktivācijas trombocīti atbrīvo savas granulas, tostarp 5-HT blīvās granulās, kam ir plašs diferenciālas iedarbības diapazons uz dažādām imūnšūnām, endotēlija šūnām un gludo muskuļu šūnām.Saīsinājumi: SMC: gludās muskulatūras šūnas, EC: endotēlija šūnas, Treg: parastie T limfocīti, M Φ: makrofāgi, DC: dendrītiskās šūnas, IL: interleikīns, IFN-γ: interferons γ. Modificēts un pielāgots no Everts et al.un Hull et al.

 

PRP pretsāpju efekts

Aktivizētie trombocīti atbrīvos daudzus pro-iekaisuma un pretiekaisuma mediatorus, kas var ne tikai izraisīt sāpes, bet arī mazināt iekaisumu un sāpes.Pēc pielietošanas PRP tipiskā trombocītu dinamika maina mikro vidi pirms audu atjaunošanas un reģenerācijas, izmantojot dažādus sarežģītus ceļus, kas saistīti ar anabolismu un katabolismu, šūnu proliferāciju, diferenciāciju un cilmes šūnu regulēšanu.Šīs PRP īpašības noved pie PRP pielietošanas dažādos klīniskos patoloģiskos stāvokļos, kas parasti saistīti ar hroniskām sāpēm (piemēram, sporta traumas, ortopēdiskas slimības, mugurkaula slimības un sarežģītas hroniskas brūces), lai gan precīzs mehānisms nav pilnībā noteikts.

2008. gadā Evertz et al.Tas ir pirmais randomizētais kontrolētais pētījums, kurā ziņots par PRP preparāta pretsāpju iedarbību, kas sagatavots no autologā eritrocītu sedimentācijas ātruma brūnā slāņa un aktivizēts ar autologo trombīnu pēc pleca operācijas.Viņi atzīmēja būtisku vizuālās analogās skalas punktu samazināšanos, opioīdu bāzes pretsāpju līdzekļu lietošanu un veiksmīgāku pēcoperācijas rehabilitāciju.Jāatzīmē, ka tie atspoguļo aktivēto trombocītu pretsāpju efektu un spekulē par trombocītu mehānismu, kas atbrīvo 5-HT.Īsāk sakot, trombocīti neaktivizējas svaigi pagatavotā PRP.Pēc trombocītu tiešas vai netiešas aktivizēšanas (audu faktors) trombocīti maina formu un rada pietiekami nepatiesus, lai veicinātu trombocītu agregāciju.Pēc tam tie izdala intracelulāras α- un blīvas daļiņas.Audos, kas apstrādāti ar aktivētu PRP, iebruks PGF, citokīni un citas trombocītu lizosomas.Precīzāk, kad blīvas daļiņas atbrīvo savu saturu, tās atbrīvos lielu daudzumu 5-HT, kas regulē sāpes.C-PRP trombocītu koncentrācija ir 5 līdz 7 reizes augstāka nekā perifērajās asinīs.Tāpēc 5-HT izdalīšanās no trombocītiem ir astronomiska.Interesanti, ka Sprott et al.Ziņojumā tika konstatēts, ka sāpes ievērojami mazinājās pēc akupunktūras un moksibuscijas, ievērojami samazinājās trombocītu iegūtā 5-HT koncentrācija un pēc tam palielinājās 5-HT līmenis plazmā.

Perifērijā trombocīti, tuklo šūnas un endotēlija šūnas atbrīvos endogēno 5-HT audu traumas vai ķirurģiskas traumas laikā.Interesanti, ka perifērajā zonā tika atklāti dažādi neironu 5-HT receptori, kas apstiprināja, ka 5-HT var traucēt nociceptīvo transmisiju perifērajā zonā.Šie pētījumi liecina, ka 5-HT var ietekmēt perifēro audu nociceptīvo pārnešanu caur 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4 un 5-HT7 receptoriem.

5-HT sistēma ir spēcīga sistēma, kas var samazināt un palielināt sāpju pakāpi pēc kaitīgas stimulācijas.Pacientiem ar hroniskām sāpēm ziņots par nociceptīvo signālu centrālo un perifēro regulējumu un izmaiņām 5-HT sistēmā.Pēdējos gados liels skaits pētījumu ir vērsti uz 5-HT un tā attiecīgo receptoru lomu kaitīgas informācijas apstrādē un regulēšanā, kā rezultātā ir izveidotas tādas zāles kā selektīvi serotonīna atpakaļsaistes inhibitori (SSAI).Šīs zāles inhibē serotonīna atpakaļsaisti presinaptiskajos neironos pēc serotonīna atbrīvošanās.Tas ietekmē serotonīna komunikācijas ilgumu un intensitāti un ir alternatīva hronisku sāpju ārstēšana.Ir nepieciešami turpmāki klīniskie pētījumi, lai skaidri izprastu PRP iegūto 5-HT sāpju regulēšanas molekulāro mehānismu hronisku un deģeneratīvu slimību gadījumā.

Citus datus, lai atrisinātu iespējamo PRP pretsāpju efektu, var iegūt pēc pretsāpju dzīvnieku modeļa testa.Salīdzinošie statistikas secinājumi šajos modeļos ir sarežģīti, jo šajos pētījumos ir pārāk daudz mainīgo.Tomēr daži klīniskie pētījumi ir pievērsušies PRP nociceptīvajai un pretsāpju iedarbībai.Vairāki pētījumi liecina, ka pacientiem, kuri saņem tendinozes vai rotatora manžetes plīsumu ārstēšanu, sāpes mazina.Turpretim vairāki citi pētījumi ir parādījuši, ka PRP var samazināt vai pat novērst sāpes pacientiem ar cīpslu deģenerāciju, OA, plantāra fascītu un citām pēdu un potīšu slimībām.Galīgā trombocītu koncentrācija un bioloģiskais šūnu sastāvs ir identificētas kā galvenās PRP īpašības, kas palīdz novērot konsekventu pretsāpju efektu pēc PRP lietošanas.Citi mainīgie lielumi ietver PRP ievadīšanas metodi, lietošanas tehnoloģiju, trombocītu aktivācijas protokolu, PGF un atbrīvoto citokīnu bioloģiskās aktivitātes līmeni, PRP lietošanas audu veidu un traumas veidu.

Jāatzīmē, ka Kuffler atrisināja PRP potenciālu sāpju mazināšanā pacientiem ar vieglām vai smagām hroniskām neiropātiskām sāpēm, kas ir sekundāras bojātā nereģeneratīvā nerva dēļ.Šī pētījuma mērķis ir izpētīt, vai neiropātiskās sāpes var samazināt vai mazināt, pateicoties PRP, kas veicina aksonu reģenerāciju un mērķa nervu reinervāciju.Pārsteidzoši, ka starp pacientiem, kuri saņem ārstēšanu, neiropātiskās sāpes joprojām tiek novērstas vai mazinātas vismaz sešus gadus pēc operācijas.Turklāt visi pacienti sāka mazināt sāpes trīs nedēļu laikā pēc PRP lietošanas.

Pēdējā laikā līdzīga pretsāpju PRP iedarbība ir novērota pēcoperācijas brūču un ādas kopšanas jomā.Interesanti, ka autori ziņoja par brūču sāpju fizioloģiskajiem aspektiem, kas saistīti ar asinsvadu bojājumiem un ādas audu hipoksiju.Viņi arī apsprieda angiogēzes nozīmi skābekļa un barības vielu piegādes optimizēšanā.Viņu pētījums parādīja, ka, salīdzinot ar kontroles grupu, pacientiem, kuri saņēma PRP terapiju, bija mazāk sāpju un ievērojami palielinājās angioģenēze.Visbeidzot, Johal un viņa kolēģi veica sistemātisku pārskatu un metaanalīzi un secināja, ka PRP var samazināt sāpes pēc PRP lietošanas ortopēdiskām indikācijām, īpaši pacientiem, kuri saņem ārēju epikondilītu un ceļa OA ārstēšanu.Diemžēl šajā pētījumā netika norādīta balto asins šūnu ietekme, trombocītu koncentrācija vai eksogēnu trombocītu aktivatoru izmantošana, jo šie mainīgie ietekmētu kopējo PRP efektivitāti.Optimālā PRP trombocītu koncentrācija maksimālai sāpju mazināšanai nav skaidra.Tendinozes žurku modelī trombocītu koncentrācija bija 1,0 × 10 6 / μ L, sāpes var tikt pilnībā mazinātas, savukārt PRP izraisītā sāpju mazināšana ar pusi no trombocītu koncentrācijas ir ievērojami samazināta.Tāpēc mēs mudinām veikt vairāk klīnisko pētījumu, lai izpētītu dažādu PRP preparātu pretsāpju iedarbību.

 

PRP un angiogēzes efekts

C-PRP preparāti precīzā reģeneratīvajā medicīnā ļauj piegādāt biomolekulas, kuras atbrīvo augstas trombocītu koncentrācijas, kas aktivizētas mērķa audu vietās.Tāpēc ir uzsāktas dažādas kaskādes reakcijas, kas veicina imūnregulāciju uz vietas, iekaisuma procesu un angiogēzi, lai veicinātu dzīšanu un audu atjaunošanos.

Angioģenēze ir dinamisks daudzpakāpju process, kas ietver dīgtspēju un audu mikrovaskulārus no jau esošiem asinsvadiem.Angioģenēze ir progresējusi dažādu bioloģisko mehānismu, tostarp endotēlija šūnu migrācijas, proliferācijas, diferenciācijas un dalīšanās dēļ.Šie šūnu procesi ir priekšnoteikumi jaunu asinsvadu veidošanai.Tie ir būtiski jau esošu asinsvadu augšanai, lai atjaunotu asins plūsmu un atbalstītu augstu vielmaiņas aktivitāti audu atjaunošanai un audu atjaunošanai.Šie jaunie asinsvadi nodrošina skābekļa un barības vielu piegādi, kā arī blakusproduktu izvadīšanu no apstrādātajiem audiem.

Angioģenēzes aktivitāti regulē, stimulējot angiogēno faktoru VEGF un antiangiogēnos faktorus (piemēram, angiostatīnu un trombospondīnu-1 [TSP-1]).Slimajā un degradētajā mikrovidē (ieskaitot zemu skābekļa spriedzi, zemu pH un augstu pienskābes līmeni) lokālie angiogēnie faktori atjaunos angiogēzes aktivitāti.

Vairākas trombocītos šķīstošās barotnes, piemēram, pamata FGF un TGF-β un VEGF, var stimulēt endotēlija šūnas, lai radītu jaunus asinsvadus.Landsdown un Fortier ziņoja par dažādiem rezultātiem, kas saistīti ar PRP sastāvu, tostarp daudzu angiogēno regulatoru intratrombocītu avotiem.Turklāt viņi secināja, ka angiogēzes palielināšanās veicina MSK slimības dziedināšanu apgabalos ar sliktu vaskularizāciju, piemēram, meniska plīsumā, cīpslu ievainojumos un citās vietās ar sliktu vaskularizāciju.

 

Veicina un anti-angiogēnas trombocītu īpašības

Pēdējo desmitgažu laikā publicētie pētījumi ir pierādījuši, ka trombocītiem ir galvenā loma primārajā hemostāzē, trombu veidošanā, augšanas faktora un citokīnu izdalīšanā un angiogēzes regulēšanā kā daļa no audu atjaunošanas procesa.Paradoksāli, bet PRP α- granulas satur pro-angiogēno augšanas faktoru, antiangiogēno proteīnu un citokīnu (piemēram, PF4, plazminogēna aktivatora inhibitoru-1 un TSP-1) arsenālu, un tās ir vērstas uz specifisku faktoru izdalīšanos, kam ir nozīme. .Loma angiogenēzē.Tāpēc PRP lomu angiogēzes regulēšanas kontrolē var definēt, aktivizējot specifiskus šūnu virsmas receptorus, TGF-β ierosina pro-angiogēnas un antiangiogēnas reakcijas.Trombocītu spēja izmantot angiogēzes ceļu ir apstiprināta patoloģiskajā angioģenēzē un audzēja angioģenēzē.

No trombocītiem iegūts angiogēns augšanas faktors un antiangiogēns augšanas faktors, kas iegūts no α-Un blīvām un adhezīvām molekulām.Vissvarīgākais ir tas, ka ir vispāratzīts, ka trombocītu kopējā ietekme uz angiogenēzi ir pro-angiogēna un stimulējoša.Paredzams, ka PRP terapija kontrolēs angiogēzes indukciju, kas veicinās daudzu slimību, piemēram, brūču dzīšanas un audu remonta, ārstēšanas efektu.PRP ievadīšana, precīzāk augstas koncentrācijas PGF un citu trombocītu citokīnu ievadīšana, var izraisīt angioģenēzi, angioģenēzi un arterioģenēzi, jo stromas šūnu faktors 1a saistās ar CXCR4 receptoru endotēlija cilmes šūnās.Bils u.c.Tiek ierosināts, ka PRP palielina išēmisku neovaskularizāciju, kas var būt saistīta ar angioģenēzes, angioģenēzes un arterioģenēzes stimulāciju.Viņu in vitro modelī endotēlija šūnu proliferāciju un kapilāru veidošanos izraisīja liels skaits dažādu PDG, no kuriem VEGF bija galvenais angiogēnais stimulators.Vēl viens svarīgs un būtisks faktors angiogēzes ceļa atjaunošanai ir sinerģija starp vairākiem PGF.Ričardsons u.c.Tika pierādīts, ka angiogēnā faktora trombocītu atvasinātā augšanas faktora-bb (PDGF-BB) un VEGF sinerģiskā aktivitāte izraisīja strauju nobrieduša asinsvadu tīkla veidošanos, salīdzinot ar individuālā augšanas faktora aktivitāti.Šo faktoru kopējā ietekme nesen tika apstiprināta pētījumā par smadzeņu nodrošinājuma cirkulācijas uzlabošanos pelēm ar ilgstošu hipoperfūziju.

Vissvarīgākais ir tas, ka in vitro pētījumā tika mērīta cilvēka nabas vēnu endotēlija šūnu un dažādu trombocītu koncentrāciju proliferatīvā ietekme uz PRP sagatavošanas ierīces un trombocītu devas stratēģijas izvēli, un rezultāti parādīja, ka optimālā trombocītu deva bija 1,5 × 10 6 trombocīti/μ 50. Veicināt angiogenēzi.Pārāk augsta trombocītu koncentrācija var kavēt angioģenēzes procesu, tāpēc efekts ir vājš.

 

Šūnu novecošanās, novecošanās un PRP

Šūnu novecošanos var izraisīt dažādi stimuli.Tas ir process, kurā šūnas pārtrauc dalīties un tiek pakļautas unikālas fenotipiskas izmaiņas, lai novērstu bojāto šūnu neierobežotu augšanu, kam ir svarīga loma vēža profilaksē.Fizioloģiskās novecošanās procesā šūnu replikācijas novecošanās veicinās arī šūnu novecošanos, samazināsies MSC reģenerācijas spējas.

 

Novecošanās un šūnu novecošanās ietekme

In vivo daudzi šūnu veidi novecošanās laikā novecos un uzkrājas dažādos audos, starp kuriem ir liels skaits novecojošu šūnu.Šķiet, ka novecojošo šūnu uzkrāšanās palielinās līdz ar vecumu, imūnsistēmas bojājumiem, audu bojājumiem vai ar stresu saistītiem faktoriem.Šūnu novecošanās mehānisms ir identificēts kā ar vecumu saistītu slimību, piemēram, osteoartrīta, osteoporozes un starpskriemeļu disku deģenerācijas, patogēns faktors.Dažādi stimuli pastiprinās šūnu novecošanos.Atbildot uz to, ar novecošanos saistītais sekrēcijas fenotips (SASP) izdalīs augstu olbaltumvielu šūnu un citokīnu koncentrāciju.Šis īpašais fenotips ir saistīts ar novecojošām šūnām, kurās tās izdala augstu iekaisuma citokīnu līmeni (piemēram, IL-1, IL-6, IL-8), augšanas faktorus (piemēram, TGF-β、 HGF, VEGF, PDGF), MMP un katepsīns.Salīdzinot ar jauniešiem, ir pierādīts, ka SAPS palielinās līdz ar vecumu, jo tiek iznīcināts līdzsvara stāvokļa process, kā rezultātā notiek šūnu novecošanās un samazinās reģenerācijas spējas.Konkrēti, locītavu un skeleta muskuļu slimībās.Šajā sakarā imūnās novecošanās tiek uzskatīta par būtiskām izmaiņām imūnšūnu sekrēcijas spektrā, kas liecina, ka TNF-a, IL-6 un/vai Il-1b koncentrācija palielinās, izraisot zemas pakāpes hronisku iekaisumu.Ir vērts atzīmēt, ka cilmes šūnu disfunkcija ir saistīta arī ar ne-šūnu autonomiem mehānismiem, piemēram, novecojošām šūnām, īpaši pro-iekaisuma un pretreģeneratīvo faktoru veidošanos, izmantojot SASP.

Gluži pretēji, SASP var arī stimulēt šūnu plastiskumu un blakus esošo šūnu pārprogrammēšanu.Turklāt SASP var organizēt saziņu ar dažādiem imūnmediatoriem un aktivizēt imūnās šūnas, lai veicinātu novecojošo šūnu klīrensu.Izpratne par novecojošo šūnu lomu un funkcijām veicinās MSK muskuļu un hronisku brūču dzīšanu un audu pārveidošanu.

Zīmīgi, ka Ritcka et al.Tika veikts plašs pētījums, atklāta SASP galvenā un labvēlīgā loma šūnu plastiskuma un audu reģenerācijas veicināšanā, kā arī ieviesta novecojošu šūnu pārejošas ārstēšanas koncepcija.Viņi piesardzīgi minēja, ka novecošana galvenokārt ir labvēlīgs un atjaunojošs process.

 

Šūnu novecošanās un PRP potenciāls

Samazinoties cilmes šūnu skaitam, novecošana ietekmēs cilmes šūnu darbību.Tāpat cilvēkiem cilmes šūnu īpašības (piemēram, sausums, proliferācija un diferenciācija) arī samazinās līdz ar vecumu.Vangs un Nirmala ziņoja, ka novecošana samazinās cīpslu šūnu cilmes šūnu īpašības un augšanas faktora receptoru skaitu.Pētījums ar dzīvniekiem parādīja, ka PDGF koncentrācija jauniem zirgiem bija augsta.Viņi secināja, ka, palielinoties GF receptoru skaitam un GF skaitam jauniem indivīdiem, var būt labāka šūnu reakcija uz PRP ārstēšanu nekā gados vecākiem indivīdiem jauniem indivīdiem.Šie atklājumi atklāj, kāpēc PRP ārstēšana var būt mazāk efektīva vai pat neefektīva gados vecākiem pacientiem ar mazāk cilmes šūnu un "sliktu kvalitāti".Ir pierādīts, ka pēc PRP injekcijas tiek apgriezts skrimšļa novecošanās process un palielināts hondrocītu atpūtas periods.Jia et al.To izmanto, lai pētītu peļu dermas fibroblastus in vitro fotonovecošanos, ar un bez PRP apstrādes, lai noskaidrotu PGF pretdarbības mehānismu šajā modelī.PRP grupa uzrādīja tiešu ietekmi uz ārpusšūnu matricu, palielināja I tipa kolagēna līmeni un samazināja metaloproteināžu sintēzi, norādot, ka PRP var neitralizēt šūnu novecošanos, kā arī deģeneratīvas MSK slimības gadījumā.

Citā pētījumā PRP tika izmantots, lai savāktu novecojušas kaulu smadzeņu cilmes šūnas no vecām pelēm.Ir noteikts, ka PRP var atgūt dažādas cilmes šūnu funkcijas no novecošanas, piemēram, šūnu proliferāciju un koloniju veidošanos, kā arī rekonstruēt ar šūnu novecošanos saistītos marķierus.

Nesen Oberlors un viņa kolēģi plaši pētīja šūnu novecošanās lomu muskuļu reģenerācijas vājināšanā un novērtēja PRP un trombocītu nabadzīgo plazmu (PPP) kā bioloģiskas ārstēšanas iespējas skeleta muskuļu atjaunošanai.Viņi paredzēja, ka PRP vai PPP ārstēšana skeleta muskuļu atjaunošanai būtu balstīta uz bioloģiskiem faktoriem, kas pielāgoti SASP specifiskiem šūnu marķieriem un citiem faktoriem, kas izraisa fibrozes attīstību.

Ir pamatoti uzskatīt, ka pirms PRP lietošanas mērķtiecīga šūnu novecošana var uzlabot bioloģiskās ārstēšanas efektivitātes reģenerācijas īpašības, samazinot lokālos SASP faktorus.Ir ierosināts, ka vēl viena iespēja uzlabot PRP un PPP ārstēšanas rezultātus skeleta muskuļu reģenerācijai ir selektīvi noņemt novecojošas šūnas ar novecojošiem tīrīšanas līdzekļiem.Nav šaubu, ka jaunākie pētījumu rezultāti par PRP ietekmi uz šūnu novecošanos un novecošanos ir aizraujoši, taču tie joprojām ir sākuma stadijā.Tāpēc šobrīd nav saprātīgi izteikt kādus ieteikumus.

 

 

 

 

(Šī raksta saturs tiek atkārtoti izdrukāts, un mēs nesniedzam nekādas tiešas vai netiešas garantijas par šajā rakstā ietvertā satura precizitāti, uzticamību vai pilnīgumu, un mēs neesam atbildīgi par šī raksta viedokļiem, lūdzu, saprotiet.)


Publicēšanas laiks: 01.03.2023